陈瑞旭^1,2 , 彭丽桃^1,2 , 叶俊丽³ , 杨书珍^1,2*

1 华中农业大学食品科技学院, 武汉, 430070; 2 食品环境学教育部重点实验室, 武汉, 430070; 3 华中农业大学园艺林学学院, 武汉, 430070
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《分子植物育种》印刷版, 2018 年, 第 16 卷, 第 16 篇   
收稿日期: 2018年03月01日    接受日期: 2018年03月16日    发表日期: 2019年01月17日

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花色素苷是草莓果实的主要呈色物质，无色花色素双加氧酶(LDOX)是花色素苷合成途径中的关键酶。为探究 LDOX 基因在草莓花色素苷合成途径中的功能特性，构建‘法兰地’草莓 LDOX 基因的过表达与沉默载体。本试验用 RT-PCR 方法克隆出‘法兰地’草莓 LDOX 基因的 CDS 序列(1 152 bp)及干扰片段(468 bp)，并成功用植物表达载体 pRI101-An-EGFP 及干扰载体 pK7GWIWG2(Ⅱ)构建了过表达载体及沉默载体，同时对 LDOX 基因序列进行了生物信息学分析。经农杆菌介导瞬时转化后，可以观察到绿色荧光蛋白，表明过表达载体及沉默载体已成功转染草莓果实。qRCR 验证表明，相比对照组果实，LDOX 基因过表达的草莓果实基因表达量增加了 3.7 倍，沉默果实下降了 70%，表明 LDOX 基因过表达与沉默成功。本研究为进一步探究 LDOX基因的功能特性提供指导。

草莓；花色素苷；过表达与沉默；LDOX